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| 品牌(pai) | NobleRyder/諾博(bo)萊德 | 貨(huo)號(hao) | BN6009 |
|---|---|---|---|
| 規格(ge) | 50T/24S | 供(gong)貨(huo)周(zhou)期(qi) | 現(xian)貨(huo) |
| 主(zhu)要用途 | 碳水(shui)化合(he)物(wu)消化吸(xi)收(shou)的關鍵酶(mei)之(zhi)壹,能(neng)夠(gou)水解蔗糖(tang)變(bian)成(cheng)相應(ying)的單糖(tang)而(er)被(bei)機體吸(xi)收(shou) | 應(ying)用領(ling)域 | 環(huan)保(bao),化工(gong),生(sheng)物(wu)產業(ye),農林(lin)牧漁,制藥/生物(wu)制藥 |
植(zhi)物(wu)蔗糖(tang)酶(mei)(sucrase)試劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)書
分光光度法(fa) 50 管(guan)/24 樣(yang)
植(zhi)物(wu)蔗糖(tang)酶(mei)sucrase試劑(ji)盒(he)
正(zheng)式(shi)測定前務必取 2-3 個預(yu)期(qi)差異較(jiao)大的樣(yang)本(ben)做預(yu)測(ce)定測定意(yi)義:
蔗(zhe)糖(tang)酶(mei)(EC 3.2.1.26)是碳水(shui)化合(he)物(wu)消化吸(xi)收(shou)的關鍵酶(mei)之(zhi)壹,能(neng)夠(gou)水解蔗糖(tang)變(bian)成(cheng)相應(ying)的單糖(tang)而(er)被(bei)機體吸(xi)收(shou)。
測(ce)定(ding)原理:
本(ben)試劑(ji)盒(he)采(cai)用 3.5-二硝(xiao)基水楊(yang)酸(suan)法(fa)測(ce)定(ding)蔗糖(tang)酶(mei)催(cui)化產(chan)生的還原糖(tang)的含量,由此可得出蔗(zhe)糖(tang)酶(mei)水(shui)解速度(du)。其(qi)原(yuan)理是 3.5-二硝(xiao)基水楊(yang)酸(suan)與(yu)還原糖(tang)共(gong)熱(re)被(bei)還原(yuan)成(cheng)棕(zong)紅色(se)的氨基化合(he)物(wu),在壹定範圍內(nei)還原(yuan)糖(tang)的量和反(fan)應(ying)液的顏色深(shen)度成(cheng)正比。此法(fa)操(cao)作(zuo)簡(jian)便(bian)、迅速、雜質(zhi)幹(gan)擾較(jiao)小。
組(zu)成(cheng):
產(chan)品(pin)名稱 | BN6009-50T/24S | Storage |
提(ti)取液:液體(ti) | 60ml | 4℃ |
試劑(ji)壹:液體(ti) | 2.5ml | 4℃ |
試劑(ji)二:粉(fen)劑(ji) | 1 支 | 4℃ |
試劑(ji)三:液體(ti) | 5ml | 常(chang)溫(wen) |
、說(shuo)明(ming)書 | 壹份 | |
試劑(ji)二:粉(fen)劑(ji)×1 支 ,4℃保存,用時(shi)加(jia)入(ru) 1.5ml 蒸餾水充分溶(rong)解;用不完的試劑(ji) 4℃保存;
自備儀(yi)器(qi)和用品:
可(ke)見(jian)分光光度計、沸水(shui)浴、可調(tiao)式(shi)移(yi)液器(qi)、1ml 玻(bo)璃(li)比色皿(min)、研(yan)缽(bo)、冰(bing)和(he)蒸(zheng)餾水。
樣(yang)品(pin)測(ce)定的準備:
按(an)照組(zu)織質(zhi)量(g):提(ti)取液體(ti)積(ml)為(wei) 1:5~10 的比例(li)(建議(yi)稱取約 0.1g 組(zu)織,加(jia)入(ru) 1ml 提(ti)取液),進(jin)行冰(bing)浴勻漿(jiang)。8000g 4℃離(li)心 10min,取上(shang)清(qing),置(zhi)冰(bing)上(shang)待(dai)測。
加(jia)樣(yang)表(biao)測(ce)定(ding)步驟(zhou):
試劑(ji)名稱(μl) | 對照(zhao)管(guan) | 測(ce)定(ding)管(guan) |
試劑(ji)壹 | 50 | 50 |
蒸(zheng)餾水 | 50 |
樣(yang)本(ben) | 100 | 100 | ||
試劑(ji)二 | 50 |
置(zhi)於(yu) 25℃準確水浴 10min
試劑(ji)三 | 100 | 100 |
混勻, 95℃水浴 5min 左右(蓋緊,防(fang)止水分散(san)失(shi)),冷卻至(zhi)室(shi)溫(wen)
蒸(zheng)餾水 | 700 | 700 |
混勻,520nm 蒸餾水調(tiao)零(ling),測(ce)定各管(guan)吸(xi)光值,ΔA=A 測定-A 對照(zhao),每個測(ce)定(ding)管(guan)設(she)壹個對照(zhao)管(guan)。
蔗(zhe)糖(tang)酶(mei)活力(li)計(ji)算:
1、標(biao)準(zhun)條件下測定(ding)的回歸方程(cheng)為(wei) y = 0.1296x -0.12;x 為(wei)標(biao)準(zhun)品濃度(mg/ml),y 為(wei)吸(xi)光值。
2、按(an)照蛋(dan)白濃(nong)度計算
單(dan)位定義:每mg 組(zu)織蛋(dan)白每分鐘催(cui)化水(shui)解 1μg 蔗糖(tang)定(ding)義為(wei)壹個酶(mei)活力(li)單(dan)位。
蔗(zhe)糖(tang)酶(mei)活力(li)(μg/min/mg prot)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(V1×Cpr)÷T=771×(ΔA +0.12)÷Cpr。
3、按(an)樣(yang)本(ben)鮮(xian)重(zhong)計(ji)算(suan)
單(dan)位定義:每g 組(zu)織每分鐘催(cui)化水(shui)解 1μg 蔗糖(tang)定(ding)義為(wei)壹個酶(mei)活力(li)單(dan)位。
蔗(zhe)糖(tang)酶(mei)活力(li)(μg/min/g 鮮(xian)重(zhong))=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=771×(ΔA +0.12) ÷W。
1000:1mg/ml=1000μg/ml;V1:加(jia)入(ru)反(fan)應(ying)體系(xi)中樣(yang)本(ben)體(ti)積(ji),0.1ml;V2:加(jia)入(ru)提(ti)取液體(ti)積,1ml;T:反(fan)應(ying)時(shi)間,10min; Cpr:樣(yang)本(ben)蛋(dan)白質(zhi)濃度(du),mg/ml;W:樣(yang)本(ben)鮮(xian)重(zhong),g。
植(zhi)物(wu)蔗糖(tang)酶(mei)sucrase試劑(ji)盒(he)