蔗糖(tang)轉(zhuan)化酶(mei)（Invertase，Ivr）催(cui)化蔗糖(tang)不(bu)可逆(ni)地(di)分(fen)解為(wei)果糖(tang)和葡萄(tao)糖(tang)，是(shi)高(gao)等(deng)植(zhi)物蔗糖(tang)代(dai)謝(xie)關(guan)鍵(jian)酶(mei)之壹(yi)。根(gen)據最適 pH，將(jiang)高(gao)等植物Ivr 分(fen)為(wei)酸(suan)性(xing)轉(zhuan)化酶(mei)（AI）和中(zhong)性(xing)轉(zhuan)化酶(mei)（NI）兩種(zhong)類(lei)型。NI 主(zhu)要(yao)存在於細(xi)胞(bao)質(zhi)中(zhong)，負責分(fen)解細胞(bao)質(zhi)中(zhong)蔗糖(tang)為(wei)果糖(tang)和葡萄(tao)糖(tang)。
中(zhong)性(xing)轉(zhuan)化酶(mei)試(shi)劑盒(he) 蔗糖(tang)

中性(xing)轉(zhuan)化酶(mei)（Neutral invertase, NI）試(shi)劑盒(he)說(shuo)明(ming)書(shu)

分(fen)光光度(du)法(fa) 50 管(guan)/24 樣(yang)

中性(xing)轉(zhuan)化酶(mei)試(shi)劑盒(he) 蔗糖(tang)

正式測定前務必(bi)取 2-3 個預期(qi)差(cha)異較大(da)的(de)樣(yang)本做(zuo)預(yu)測定測定意義(yi)：

蔗糖(tang)轉(zhuan)化酶(mei)（Invertase，Ivr）催(cui)化蔗糖(tang)不(bu)可逆(ni)地(di)分(fen)解為(wei)果糖(tang)和葡萄(tao)糖(tang)，是(shi)高(gao)等(deng)植(zhi)物蔗糖(tang)代(dai)謝(xie)關(guan)鍵(jian)酶(mei)之壹(yi)。根(gen)據最適 pH，將(jiang)高(gao)等植物Ivr 分(fen)為(wei)酸(suan)性(xing)轉(zhuan)化酶(mei)（AI）和中(zhong)性(xing)轉(zhuan)化酶(mei)（NI）兩種(zhong)類(lei)型。NI 主(zhu)要(yao)存在於細(xi)胞(bao)質(zhi)中(zhong)，負責分(fen)解細胞(bao)質(zhi)中(zhong)蔗糖(tang)為(wei)果糖(tang)和葡萄(tao)糖(tang)。

測定原理：

NI 催化蔗糖(tang)分(fen)解產生還(hai)原(yuan)糖(tang)，進壹步(bu)與(yu) 3,5－二(er)硝(xiao)基(ji)水楊(yang)酸(suan)反(fan)應，生成(cheng)棕(zong)紅(hong)色(se)氨(an)基(ji)化合(he)物(wu)，在 510nm有特(te)征光吸(xi)收，在壹(yi)定範(fan)圍內(nei) 510nm 光吸收(shou)值與(yu)還(hai)原(yuan)糖(tang)生(sheng)成(cheng)量(liang)成(cheng)正(zheng)比(bi)。通(tong)過(guo)光(guang)吸收(shou)增(zeng)加速率來計算 NI 活性(xing)

組成(cheng)：

試(shi)劑二(er)：粉(fen)劑×1 瓶，4℃保存(cun)；臨用(yong)前(qian)加入 25ml 試(shi)劑壹(yi)充分(fen)溶解備用(yong)；用(yong)不(bu)完(wan)的(de)試(shi)劑 4℃保存(cun)；

自備儀器(qi)和用(yong)品：

可見(jian)分(fen)光光度(du)計、臺式離心機(ji)、水浴鍋(guo)、移(yi)液(ye)器(qi)、1ml 玻(bo)璃比色(se)皿、研缽、冰和蒸(zheng)餾水。

粗酶液(ye)提(ti)取(qu)：

按照組(zu)織(zhi)質(zhi)量(liang)（g）：提(ti)取(qu)液(ye)體積(ji)(ml)為(wei) 1：5~10 的比例(li)（建議稱取(qu)約 0.1g 組織(zhi)，加入 1ml 提(ti)取(qu)液(ye)），進行冰浴勻漿(jiang)。12000g 4℃離心 10min，取(qu)上(shang)清(qing)，置冰(bing)上待測。

測定步(bu)驟(zhou)和加樣表：

混勻， 37℃準(zhun)確(que)水浴 30min 後，95℃水浴 10min（蓋(gai)緊，以防止水(shui)分(fen)散失），流(liu)水(shui)冷(leng)卻(que)後充分(fen)混勻（以保證濃(nong)度(du)不變）

混勻，95℃水浴 10min（蓋(gai)緊，以防止水(shui)分(fen)散失），流(liu)水(shui)冷(leng)卻(que)後充分(fen)混勻， 510nm 處(chu)蒸餾(liu)水(shui)調零，記(ji)錄各管(guan)吸(xi)光值A，如(ru)果吸(xi)光值大(da)於 2，可以用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)稀(xi)釋(shi)後測定（計算公式中乘(cheng)以相(xiang)應稀(xi)釋(shi)倍數(shu)），ΔA=A 測定-A 對照。

NI 活性(xing)計算：

標(biao)準(zhun)條(tiao)件(jian)下(xia)測(ce)定的回歸方(fang)程(cheng)為(wei) y = 0.0016x -0.001；x 為(wei)標(biao)準(zhun)品濃(nong)度(du)（μg/ml），y 為(wei)吸光值。

按蛋白濃(nong)度(du)計算：

單位(wei)的定義：37℃每(mei)mg 蛋白每(mei)分(fen)鐘產生 1μg 還原糖(tang)定義為(wei)壹個酶活性(xing)單(dan)位(wei)。

NI 活性(xing)（μg /min/mg prot）＝[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V1]÷(V1×Cpr ) ÷T=20.8×(ΔA +0.001) ÷Cpr

按鮮重(zhong)計算：

單位(wei)的定義：37℃每(mei)g 組織(zhi)每(mei)分(fen)鐘產生 1μg 還原糖(tang)定義為(wei)壹個酶活性(xing)單(dan)位(wei)。

NI 活性(xing)（μg /min/g 鮮重(zhong)）＝[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V1]÷(W×V1÷V2) ÷T=20.8×(ΔA +0.001) ÷W

V1：加入反(fan)應體系中(zhong)樣(yang)本體積(ji)，0.2ml；V2：加入提(ti)取(qu)液(ye)體積(ji)，1ml；T：反(fan)應時間(jian)，30min； Cpr：樣本蛋白質(zhi)濃(nong)度(du)，mg/ml；W：樣本鮮重(zhong)，g。

中性(xing)轉(zhuan)化酶(mei)試(shi)劑盒(he) 蔗糖(tang)