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| 品(pin)牌 | NobleRyder/諾博(bo)萊德(de) | 貨(huo)號(hao) | BO6031 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格(ge) | 100T/48S | 供(gong)貨周(zhou)期(qi) | 現貨 |
| 主(zhu)要(yao)用途 | S-LAP 是(shi)壹類能水解(jie)肽鏈 N-末(mo)端為亮an酸的(de)酶(mei),由(you)土(tu)壤(rang)微生物(wu)分(fen)泌 | 應(ying)用領(ling)域 | 環保(bao),化(hua)工(gong),生物(wu)產業,農(nong)林牧漁(yu),制(zhi)藥/生物(wu)制(zhi)藥 |
土(tu)壤(rang)亮an酸氨(an)基肽酶(Solid-Leucine Aminopeptidase,S- LAP)試劑盒(he)說明書
微量法(fa) 100 管(guan)/48 樣(yang)
土(tu)壤(rang)亮an酸氨(an)基肽酶試劑盒(he)
正式(shi)測(ce)定(ding)前(qian)務必(bi)取(qu) 2-3 個預(yu)期差(cha)異(yi)較大的(de)樣(yang)本做(zuo)預(yu)測定(ding)測定(ding)意(yi)義:
S-LAP 是壹類能水解(jie)肽鏈 N-末(mo)端為亮an酸的(de)酶(mei),由(you)土(tu)壤(rang)微生物(wu)分(fen)泌。S-LAP活(huo)性(xing)變化(hua)與(yu)機(ji)體某(mou)些(xie)病(bing)理(li)狀態(tai)密(mi)切相關。
測定(ding)原理(li):
S-LAP 分(fen)解(jie)L-亮an酰對(dui)硝(xiao)基苯(ben)胺(an)生成(cheng)對(dui)硝(xiao)基苯(ben)胺(an),後(hou)者(zhe)在(zai) 405nm 有最大吸收(shou)峰,通(tong)過測定(ding)吸光值(zhi)升(sheng)高(gao)速(su)率來(lai)計算S-LAP 活(huo)性(xing)。
試劑的(de)組(zu)成(cheng)和(he)配(pei)制(zhi):
產品(pin)名(ming)稱(cheng) | BO6031-100T/48S | Storage |
試劑壹:液體(ti) | 35ml | 4℃ |
試劑二(er):粉劑(ji) | 1 瓶 | -20℃ |
說明書 | 壹份 | |
自(zi)備儀器和(he)用(yong)品(pin):
酶標(biao)儀/可見(jian)分(fen)光光(guang)度計、臺式(shi)離(li)心機(ji)、水浴鍋、可調(tiao)式(shi)移(yi)液(ye)器、96 孔板/微量石英比(bi)色皿和(he)蒸(zheng)餾水。
S-LAP 測定(ding)步(bu)驟(zhou):
1、分(fen)光光(guang)度計或酶標儀(yi)預(yu)熱 30min 以上(shang),調節波(bo)長(chang)至 405nm,蒸(zheng)餾水調零(ling)。
2、在試劑二(er)瓶中加入(ru) 15ml 試劑壹充(chong)分(fen)溶解(jie)(如(ru)較難(nan)溶(rong)解(jie),可 60℃水浴加熱約(yue) 30min 促進溶解(jie));用不(bu)完的(de)試劑分(fen)裝後(hou)-20℃保(bao)存,禁止(zhi)反復(fu)凍融。
3、操作(zuo)表(biao):
試劑名(ming)稱(cheng) | 對(dui)照(zhao)管(guan) | 測定(ding)管(guan) |
新鮮(xian)土(tu)樣(yang)(g) | 0.05 | 0.05 |
試劑壹(μl) | 300 | |
試劑二(er)(μl) | 300 |
混勻, 37℃振蕩(dang)反應(ying) 1h 後(hou),8000g 4℃離(li)心 10min,取(qu) 200μl 上(shang)清(qing)液於(yu)微量石英比(bi)色皿或(huo) 96 孔板中,405nm 處測定(ding)吸(xi)光(guang)值(zhi) A,計算ΔA=A 測定管(guan)-A 對(dui)照(zhao)管(guan)。每(mei)個測定管(guan)設(she)壹個對(dui)照(zhao)管(guan)。
S-LAP 活(huo)力單位(wei)的(de)計算:
用微(wei)量石英比(bi)色皿測(ce)定(ding)的(de)計算公式(shi)如(ru)下
單位(wei)的(de)定(ding)義:每天(tian)每 g 土(tu)樣(yang)每天(tian)生成(cheng) 1 μmol 對(dui)硝(xiao)基苯(ben)胺(an)定義為壹個酶(mei)活(huo)力單位(wei)。
S-LAP(μmol/d /g 土(tu)樣(yang))=ΔA×V 反總÷(ε×d)×106÷W÷T=14.8×ΔA
V 反總:反應(ying)體(ti)系(xi)總體(ti)積,3×10-4 L;ε:對(dui)硝(xiao)基苯(ben)胺(an)摩爾消(xiao)光(guang)系(xi)數,9.72×103 L / mol /cm;d:比(bi)色皿光(guang)徑,1cm;T:反應(ying)時間,1h=1/24d; W:樣(yang)本質(zhi)量,0.05g。
用 96 孔板測定的(de)計算公式(shi)如(ru)下
單位(wei)的(de)定(ding)義:每天(tian)每 g 土(tu)樣(yang)每天(tian)生成(cheng) 1 μmol 對(dui)硝(xiao)基苯(ben)胺(an)定義為壹個酶(mei)活(huo)力單位(wei)。
S-LAP(μmol/d /g 土(tu)樣(yang))=ΔA×V 反總÷(ε×d)×106÷W÷T=29.6×ΔA
V 反總:反應(ying)體(ti)系(xi)總體(ti)積,3×10-4 L;ε:對(dui)硝(xiao)基苯(ben)胺(an)摩爾消(xiao)光(guang)系(xi)數,9.72×103 L / mol /cm;d:比(bi)色皿光(guang)徑,0.5cm;T:反應(ying)時間,1h=1/24d; W:樣(yang)本質(zhi)量,0.05g。
土(tu)壤(rang)亮an酸氨(an)基肽酶試劑盒(he)