在(zai)弱酸性條(tiao)件(jian)下(xia)，FFA 與銅(tong)鹽(yan)反(fan)應(ying)生(sheng)成銅(tong)皂(zao)，在(zai) 715nm 處(chu)有(you)特(te)征(zheng)吸(xi)收(shou)峰，在(zai)壹(yi)定(ding)範(fan)圍(wei)內(nei)遊(you)離(li)脂肪酸含量(liang)與(yu)顯色程度呈(cheng)線性關系(xi)。
遊(you)離(li)脂肪酸FFA含量(liang)試(shi)劑盒

遊(you)離(li)脂肪酸（FFA）含量(liang)試(shi)劑盒（測植(zhi)物(wu)組(zu)織）

微(wei)量(liang)法(fa) 100T/48S

遊(you)離(li)脂肪酸FFA含量(liang)試(shi)劑盒

正(zheng)式(shi)測定(ding)前(qian)務必(bi)取(qu) 2-3 個(ge)預(yu)期(qi)差異(yi)較(jiao)大的樣本做(zuo)預測定(ding)測定(ding)意(yi)義：

FFA 既(ji)是脂(zhi)肪水(shui)解的產(chan)物(wu)，又(you)是(shi)脂(zhi)肪(fang)合成的底物(wu)。FFA 的濃度(du)與(yu)脂(zhi)類(lei)代謝、糖代謝、內(nei)分(fen)泌功能有關，也(ye)可反(fan)映(ying)食(shi)物(wu)貯藏(zang)中(zhong)的品(pin)質(zhi)變化。

測定(ding)原(yuan)理(li)：

在(zai)弱酸性條(tiao)件(jian)下(xia)，FFA 與(yu)銅(tong)鹽(yan)反(fan)應(ying)生(sheng)成銅(tong)皂(zao)，在(zai) 715nm 處(chu)有(you)特(te)征(zheng)吸(xi)收(shou)峰，在(zai)壹(yi)定(ding)範(fan)圍(wei)內(nei)遊(you)離(li)脂肪酸含量(liang)與(yu)顯色程度呈(cheng)線性關系(xi)。

組(zu)成：

自備(bei)儀(yi)器(qi)和用品(pin)：

研(yan)缽(bo)、臺(tai)式(shi)離(li)心(xin)機、震(zhen)蕩(dang)儀(yi)、可(ke)見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計/酶(mei)標儀(yi)、微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比(bi)色皿/96 孔(kong)板。

樣品中(zhong) FFA 提(ti)取(qu)：

組(zu)織用(yong)蒸餾(liu)水(shui)沖(chong)洗(xi)幹(gan)凈後(hou)，用吸(xi)水(shui)紙吸(xi)取(qu)表(biao)面(mian)水(shui)分，搗(dao)碎後(hou)按(an)照組(zu)織質(zhi)量(liang)（g）：提(ti)取(qu)液(ye)體積(ji)(ml)為 1：5~10的比(bi)例(li)（建(jian)議稱取(qu)約(yue) 0.1g 組(zu)織，加(jia)入(ru) 1ml 試劑壹(yi)）加(jia)入(ru)試劑壹(yi)，震(zhen)蕩(dang)提(ti)取(qu) 3h，8000g，4℃離(li)心(xin) 10min，取(qu)上(shang)清液(ye)待(dai)測。

測定(ding)操(cao)作：

分(fen)光(guang)光(guang)度計/酶(mei)標儀(yi)預(yu)熱 30 min，調(tiao)節(jie)波(bo)長(chang)到(dao) 715 nm。

對照管(guan)：取(qu)上(shang)清液(ye) 0.4ml，加(jia) 0.2ml 試(shi)劑二(er)，充分震(zhen)蕩(dang) 5min，室溫(wen)靜置 5min，取(qu)上(shang)層(ceng) 200μl 於(yu)微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比(bi)色皿/96 孔(kong)板，調(tiao)零(ling)。

測定(ding)管(guan)：取(qu)上(shang)清液(ye) 0.4ml，加(jia) 0.2ml 試(shi)劑三，充(chong)分(fen)震蕩 5min，室(shi)溫靜(jing)置(zhi) 5min，取(qu)上(shang)層(ceng) 200μl 於(yu)微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比(bi)色皿/96 孔(kong)板，測定(ding)吸(xi)光值(zhi)，記(ji)為(wei)A。

FFA 含量(liang)計算(suan)：

a. 使用(yong)微(wei)量(liang)石(shi)英(ying)比(bi)色皿測定(ding)的計算(suan)公(gong)式(shi)如(ru)下(xia)

標(biao)準曲線：y=0.0075 x+ 0.0055，R2=0.994

按(an)樣本蛋白濃度(du)計算(suan)

FFA（nmol/mg prot）= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1×Cpr)=133×(A-0.0055)÷Cpr

按(an)樣本質(zhi)量(liang)計算(suan)

FFA（nmol/g 鮮(xian)重(zhong)）= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1÷V2×W)=133×(A-0.0055)÷W

V1：加(jia)入(ru)樣本體積(ji)，0.4ml；V2：提(ti)取(qu)液(ye)體積(ji)，1ml；Cpr：樣本蛋白質(zhi)濃度(du)，mg/ml；W：樣品質(zhi)量(liang)，g。 b.使用(yong) 96 孔(kong)板測定(ding)的計算(suan)公(gong)式(shi)如(ru)下(xia)

標(biao)準曲線：y=0.0038 x+ 0.0055，R2=0.994

按(an)樣本蛋白濃度(du)計算(suan)

FFA（nmol/mg prot）= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1×Cpr)=266×(A-0.0055)÷Cpr

按(an)樣本質(zhi)量(liang)計算(suan)

FFA（nmol/g 鮮(xian)重(zhong)）= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1÷V2×W)=266×(A-0.0055)÷W

V1：加(jia)入(ru)樣本體積(ji)，0.4ml；V2：提(ti)取(qu)液(ye)體積(ji)，1ml； Cpr：樣本蛋白質(zhi)濃度(du)，mg/ml；W：樣品質(zhi)量(liang)，g。

註(zhu)意(yi)事項(xiang)：

蛋白含量(liang)不可直接(jie)用提(ti)取(qu)的上(shang)清液(ye)直(zhi)接(jie)測定(ding)，可(ke)用蒸(zheng)餾(liu)水(shui)或緩沖(chong)液(ye)或生(sheng)理(li)鹽水(shui)選用(yong)本公(gong)司(si)的 BCA 法(fa)蛋白含量(liang)測定(ding)試(shi)劑盒。

最di檢(jian)出限為(wei) 2 nmol/ml。

遊(you)離(li)脂肪酸FFA含量(liang)試(shi)劑盒