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| 品(pin)牌 | NobleRyder/諾(nuo)博(bo)萊德 | 貨號 | BR6020 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格 | 100T/96S | 供(gong)貨(huo)周(zhou)期(qi) | 現(xian)貨(huo) |
| 主(zhu)要(yao)用途(tu) | TG 是(shi)長鏈脂(zhi)肪(fang)酸(suan)和甘油(you)形成(cheng)的(de)脂(zhi)肪(fang)分(fen)子(zi) | 應用領(ling)域 | 環(huan)保(bao),化(hua)工(gong),生(sheng)物(wu)產業(ye),農林牧漁(yu),制(zhi)藥(yao)/生(sheng)物(wu)制(zhi)藥(yao) |
甘油三酯(zhi)(triglyceride, TG)含(han)量測定(ding)試(shi)劑盒(he)說明(ming)書(shu)
微量法 100T/96S
甘油三酯(zhi)含(han)量測定(ding)試(shi)劑盒(he) 脂(zhi)肪(fang)酸(suan)系列
正式測定(ding)前(qian)務必(bi)取 2-3 個(ge)預(yu)期(qi)差(cha)異(yi)較大的(de)樣(yang)本做(zuo)預(yu)測定(ding)測定(ding)意(yi)義:
TG 是(shi)長鏈脂(zhi)肪(fang)酸(suan)和甘油(you)形成(cheng)的(de)脂(zhi)肪(fang)分(fen)子(zi),不僅是(shi)細胞膜的(de)主(zhu)要(yao)成(cheng)分(fen),也是(shi)重要(yao)呼(hu)吸(xi)底(di)物。
測定(ding)原(yuan)理(li):
用異(yi)丙(bing)醇提取TG,脂(zhi)蛋(dan)白(bai)酯(zhi)酶水(shui)解(jie) TG 生成甘油(you)和脂(zhi)肪(fang)酸(suan)(FFA),甘油與(yu)三磷酸(suan)腺(xian)苷(gan)在(zai)甘油激酶(mei)和(he)磷酸(suan)甘油氧化酶催(cui)化(hua)下(xia)生成 H2O2,過氧化物酶(mei)催(cui)化(hua)過氧化氫(qing)氧化 4-氨(an)基(ji)安ti比林偶聯(lian)酚(fen),生成(cheng)有色(se)化合(he)物,在 505 nm 處(chu)有(you)特(te)征(zheng)吸(xi)收(shou)峰(feng)。
組成(cheng):
產品名稱(cheng) | BR6020-100T/96S | Storage |
試劑壹:液(ye)體 | 12 0ml | 4℃ |
試劑二:液(ye)體 | 12 ml | 4℃ |
試劑三:液(ye)體 | 12 ml | 4℃避(bi)光 |
說明書(shu) | 壹份 | |
自(zi)備(bei)儀(yi)器(qi)和用品(pin):
酶標儀、臺式離(li)心(xin)機(ji)、可(ke)調(tiao)式移(yi)液(ye)槍、96 孔(kong)板(ban)、研(yan)缽(bo)、冰(bing)和(he)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)
TG 的(de)提取:
1、組織(zhi)中(zhong)TG 的(de)提取:按(an)照(zhao)組織(zhi)質量(g):試劑壹體積(ji)(ml)為 1:5~10 的(de)比(bi)例(li)(建(jian)議稱(cheng)取(qu)約 0.1g 組織(zhi),加入 1ml 試(shi)劑壹(yi))進行冰浴(yu)勻漿,8000g,4℃離(li)心(xin) 10min,取(qu)上(shang)清,即TG 待測液(ye)。
2、細胞、細菌(jun)中(zhong) TG 的(de)提取:先(xian)收(shou)集(ji) 400-500 萬(wan)細(xi)胞或細(xi)菌(jun)到離(li)心(xin)管(guan)內,離(li)心(xin)後棄上(shang)清,加 1ml 試劑(ji)壹,超(chao)聲(sheng)波(bo)破(po)碎 1min(強度 20%,超(chao)聲(sheng) 2s,停(ting) 1s),8000g,4℃離(li)心(xin) 10min,取(qu)上(shang)清,即TG 待測液(ye)。
3、血(xue)清(qing)(漿)樣(yang)品:直接測定(ding)。
測定(ding)操作(zuo):
酶標儀預(yu)熱 30min,調(tiao)節波(bo)長到 505 nm。
試劑(μl) | 空(kong)白(bai)管(guan) | 測定(ding)管(guan) |
樣(yang)本 | 10 | |
試劑壹 | 10 | |
試劑二 | 95 | 95 |
試劑三 | 95 | 95 |
混勻,室(shi)溫(wen)下靜(jing)置 20min,於 505 nm 波長處(chu)讀取吸(xi)光值(zhi),記(ji)為 A 空(kong)白(bai)和A 測定(ding),△A=A 測定(ding)-A 空(kong)白(bai)。空(kong)白(bai)管(guan)只(zhi)需測壹(yi)管(guan)。
計算公式:
標準(zhun)曲(qu)線(xian):y = 0.3261x - 0.0199; R2 = 0.9979;x:標準(zhun)品(pin)濃(nong)度(mg/ml) y:吸(xi)光值(zhi)差(cha)值(zhi)ΔA。
血(xue)清(qing)(漿)中(zhong)甘(gan)油三酯(zhi)含(han)量計算:
TG 含(han)量(mg/ml)=(ΔA+0.0199)÷ 0.3261=3.07×(ΔA+0.0199)
組織(zhi)、細菌或(huo)細(xi)胞中(zhong)甘(gan)油三酯(zhi)含(han)量計算:
(1)按樣(yang)本蛋白(bai)濃(nong)度計算
TG 含(han)量(mg/ mg prot)= (ΔA+0.0199)÷0.3261×V 樣(yang)÷(Cpr×V 樣(yang))=3.07×(ΔA+0.0199)÷Cpr (2)按樣(yang)本質量計算
TG 含(han)量(mg/ g 鮮(xian)重)=(ΔA+0.0199)÷0.3261×V 樣(yang)÷(W×V 樣(yang)÷V 樣(yang)總)=3.07×(ΔA+0.0199)÷ W
V 樣(yang):加入樣(yang)本體積(ji),0.01 ml;V 樣(yang)總:加入試(shi)劑壹(yi)體積(ji),1 ml;W:樣(yang)本質量,g; Cpr:樣(yang)本蛋白(bai)質濃(nong)度,mg/ml。
註意事(shi)項:
試劑盒(he)中(zhong)有(you)易(yi)揮(hui)發(fa)性物(wu)質,實(shi)驗(yan)過程(cheng)中(zhong)需佩戴(dai)手套和(he)口罩,試劑瓶(ping)蓋打(da)開(kai)後應該(gai)及時(shi)蓋緊。
最di檢(jian)出(chu)限為 100μg/ml。
甘油三酯(zhi)含(han)量測定(ding)試(shi)劑盒(he) 脂(zhi)肪(fang)酸(suan)系列