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聯(lian)系電(dian)話(hua):10-62817090
| 品(pin)牌 | NobleRyder/諾(nuo)博(bo)萊(lai)德 | 貨(huo)號(hao) | BZ6005 |
|---|---|---|---|
| 規(gui)格 | 50T/24S | 供貨(huo)周期 | 現貨(huo) |
| 主(zhu)要(yao)用(yong)途(tu) | 能(neng)阻(zu)止(zhi)不飽和(he)脂肪酸收到(dao)過氧(yang)化作(zuo)用的(de)損傷,維(wei)持(chi)不飽和(he)脂肪酸細(xi)胞膜的(de)完整性(xing)和(he)正(zheng)常(chang)功(gong)能(neng) | 應(ying)用(yong)領(ling)域 | 環保,化工,生物產(chan)業,農林(lin)牧(mu)漁,制(zhi)藥/生物制(zhi)藥 |
維(wei)生素(su)E(Vitamin E,VE)試劑盒(he)說(shuo)明(ming)書(shu)
分(fen)光(guang)光(guang)度(du)法(fa) 50 管(guan)/24 樣
維(wei)生素(su)E試劑盒(he)
正(zheng)式(shi)測定(ding)前(qian)務必取 2-3 個預期差異較大的(de)樣本(ben)做預測定(ding)測定(ding)意義:
維(wei)生素(su)E(Vitamin E)是(shi)壹種脂溶(rong)xing維(wei)生素(su),其(qi)水(shui)解產物(wu)為(wei)生育酚,是(shi)生物體中(zhong)最主(zhu)要(yao)的(de)抗(kang)氧(yang)化劑之(zhi)壹,能(neng)阻(zu)止(zhi)不飽和(he)脂肪酸收到(dao)過氧(yang)化作(zuo)用的(de)損傷,維(wei)持(chi)不飽和(he)脂肪酸細(xi)胞膜的(de)完整性(xing)和(he)正(zheng)常(chang)功(gong)能(neng),具有(you)延(yan)緩衰(shuai)老、預防溶血(xue)性(xing)貧(pin)血(xue)作(zuo)用,在(zai)醫(yi)藥、化妝(zhuang)品、保健(jian)品(pin)、食(shi)品(pin)行(xing)業具有(you)較高(gao)的(de)應用(yong)價(jia)值(zhi)。
測定(ding)原理(li):
VE 還(hai)原(yuan)Fe3+為(wei)Fe2+,Fe2+與(yu) 1,10-菲(fei)羅啉產(chan)生有色(se)絡合物(wu),在(zai) 530nm 有(you)特征吸(xi)收峰。
組(zu)成(cheng):
產(chan)品(pin)名稱 | BZ6005-50T/24S | Storage |
提(ti)取液:液體 | 100ml | 4℃ |
試劑壹:液體 | 5ml | 4℃避光(guang) |
試劑二(er):液體 | 5ml | 4℃ |
試劑三(san):液體 | 5ml | 4℃ |
試劑四:液體 | 15ml | 4℃ |
說(shuo)明(ming)書(shu) | 壹份 | |
試劑三(san):粉劑×1 瓶,-20 ℃保存(cun),用(yong)時加(jia)入(ru) 4ml 蒸(zheng)餾(liu)水,混勻(yun),用不完的(de)試劑 4℃保存(cun)壹周;試劑四:粉劑×1 瓶,4 ℃保存(cun),用(yong)時加(jia)入(ru) 4ml 蒸(zheng)餾(liu)水,混勻(yun),用不完的(de)試劑 4℃保存(cun)壹周;自(zi)備儀(yi)器(qi)和(he)用(yong)品(pin):
天(tian)平(ping)、研缽(bo)、離心機(ji)、可(ke)見(jian)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)、1 ml 玻(bo)璃(li)比(bi)色皿(min)、漩渦(wo)震蕩(dang)儀(yi)。
樣本(ben)處(chu)理(li):
組(zu)織:按照質量(g):提(ti)取液體積(ji)(ml)為(wei) 1:5~10 的(de)比(bi)例(建(jian)議(yi)稱取約(yue) 0.2g,加(jia)入(ru) 1ml 提(ti)取液)加(jia)入(ru)提取液,充(chong)分(fen)勻(yun)漿後用提(ti)取液定(ding)至 2ml,在(zai)漩渦(wo)混勻(yun)儀(yi)上(shang)震(zhen)蕩(dang) 5min,於 25℃,5000g 離(li)心 10min,取上(shang)層(ceng)測定(ding)。
細(xi)胞:按照細(xi)胞數(shu)量(104 個):提取液體積(ji)(ml)為(wei) 500~1000:1 的(de)比(bi)例(建(jian)議(yi) 1000 萬細胞加入(ru) 2ml提(ti)取液),冰浴超聲(sheng)波(bo)破(po)碎(sui)細胞(功(gong)率 300w,超聲(sheng) 3 秒(miao),間(jian)隔(ge) 7 秒(miao),總時間(jian) 3min);在(zai)漩渦(wo)混勻(yun)儀(yi)上(shang)震(zhen)蕩(dang) 5min,於 25℃,5000g 離(li)心 10min,取上(shang)層(ceng)測定(ding)。
血(xue)清(qing):取 0.1ml,加(jia) 1.9ml 提(ti)取液,漩渦(wo)儀(yi)混勻(yun)上(shang)震(zhen)蕩(dang) 5min,於 25℃,5000g 離(li)心 10min,取上(shang)層(ceng)測定(ding)。
測定(ding)操作(zuo):
對(dui)照(zhao)管(guan) | 測定(ding)管(guan) | |
樣品(μl) | 500 | 500 |
試劑壹(μl) | 100 | 100 |
試劑二(er)(μl) | 100 | |
試劑三(san)(μl) | 100 | |
充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun),25℃反(fan)應(ying) 5min | ||
試劑四(μl) | 300 | 300 |
充(chong)分(fen)混(hun)勻(yun),於 1ml 玻(bo)璃(li)比(bi)色皿(min),無(wu)水乙醇調(tiao)零,測定(ding) 530nm 處(chu)吸(xi)光(guang)值(zhi),記(ji)為(wei) A 對(dui)照(zhao)管(guan)和(he)A 測定(ding)管(guan),△A=A 測定(ding)管(guan)-A 對(dui)照(zhao)管(guan)。 | ||
計(ji)算公式(shi):
標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian):y = 0.22x + 0.0065, R2 = 0.9978
按照蛋白含(han)量(liang)計(ji)算
VE 含(han)量(liang)(μg/mg prot)=(△A -0.0065)÷ 0.22×V 反(fan)總÷(V 樣×Cpr)
= 9.09×(△A -0.0065)÷ Cpr
按照樣本(ben)質量計(ji)算
VE 含(han)量(liang)(μg/g)=(△A -0.0065)÷ 0.22×V 反(fan)總÷(V 樣×W÷V 樣總)
= 18.18×(△A -0.0065)÷ W
按照細(xi)胞數(shu)量計(ji)算
VE 含(han)量(liang)(μg/104 cell)=(△A -0.0065)÷ 0.22×V 反(fan)總÷(V 樣×細胞數(shu)量÷V 樣總)
= 18.18×(△A -0.0065)÷ 細(xi)胞數(shu)量
按照液體體積(ji)計(ji)算
VE 含(han)量(liang)(μg/ml)=(△A -0.0065)÷ 0.22×V 反(fan)總÷V 樣×20
= 181.82×(△A -0.0065)
V 反(fan)總:反(fan)應(ying)總體積(ji),1ml;:V 樣:加入(ru)樣本(ben)體積(ji),0.5ml;V 樣總:加(jia)入(ru)提取液體積(ji),2ml; Cpr:蛋白濃度(du),mg/ml;W:樣本(ben)質量,g
註(zhu)意事項:
若(ruo)反(fan)應(ying)體系產生沈澱(dian),需要(yao)將(jiang)樣品進(jin)行(xing)適當(dang)的(de)稀釋(shi),並(bing)在(zai)計(ji)算公式(shi)中(zhong)乘以(yi)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)。
最(zui)di檢出限為(wei) 1μg/g。
維(wei)生素(su)E試劑盒(he)